Coronavirus (SARS-Cov-2) azido nukleikoa detektatzeko kit berria
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Flumeascent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Coronavirus (SARS-Cov-2) azido nukleikoa detektatzeko kit berria (RT-PCR zunda fluoreszentearen metodoa)
【Packaging specbadacations 】25 Proba/Kit
【Intended usadina】
Kit hau koronavirus berriaren azido nukleikoa detektatzeko erabiltzen da osasun-hornitzaileak COVID19 susmatzen duen pertsonei, sudur-garbiketa, orofaringea (eztarria), aurreko sudurra, erdiko turbinate, sudur-garbiketa eta sudur-aspiratuetan. Koronabirus berriaren ORF1ab eta N geneen detekzioa koronavirusaren infekzio berriaren diagnostiko laguntzaile eta monitorizazio epidemiologikorako erabil daiteke.
【Principles of the parrozadure 】
Kit hau TaqMan zunda espezifikoetarako eta ORF1ab eta N geneen sekuentziak koronavirus berrirako (SARS-Cov-2) diseinatutako lehengai espezifikoetarako diseinatuta dago. PCR erreakzio-soluzioak 3 abiarazle espezifiko eta zunda fluoreszente multzo ditu helburu espezifikoak detektatzeko, eta hasierako eta zunda fluoreszenteen multzo gehigarri bat erabiltzen da etxeko etxeko gene endogenoak detektatzeko kitaren barne-kontrol estandar gisa.
Proba-printzipioa hauxe da: zunda fluoreszente espezifikoa digeritzen eta degradatzen dela Taq entzimaren exonukleasaren jarduera PCR erreakzioan, eta, beraz, talde fluoreszente berriemailea eta fluoreszente itzalitako taldea bereizten dira, fluoreszentzia monitorizatzeko sistemak fluoreszente bat jaso dezan. seinalea, eta, ondoren, PCR anplifikazioaren aberaste-efektuaren bidez, zundaren fluoreszentzia-seinalea muga-balioa-Ct balioa (Zikloaren atalasea) iristen da. Helburu-anplikoirik ez dagoenean, zundaren berriemaile-taldea itzaltze-taldetik hurbil dago. Une honetan, fluoreszentzia-erresonantzia-energia-transferentzia gertatzen da, eta erreportari taldearen fluoreszentzia itzali egiten du kenching-taldeak, beraz, fluoreszentzia-seinalea ezin da detektatu PCR tresna fluoreszenteak.
Testan zehar erreaktiboen erabilera kontrolatzeko, kitak kontrol positibo eta negatiboez hornituta dago: kontrol positiboak xede-guneko plasmido birkonbinatzailea dauka, eta kontrol negatiboa Ur destilatua da, ingurumenaren kutsadura kontrolatzeko erabiltzen dena. Proba egiterakoan kontrol positiboa eta kontrol negatiboa aldi berean ezartzea gomendatzen da.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Konponenteak | |
| Name | Specifikazioa | Kanttasuna | Kanttasuna | |
| Kontrol positiboa | 180 μL/fiola | 1 | 1 | Artifizialki eraikitako plasmidoak, Ur destilatua |
| Kontrol negatiboa | 180 μL/fiola | 1 | 1 | Ur destilatua |
| SARS-Cov-2 Mix | 358,5 μL/fioia | 1 | / | Primer pare espezifikoak, detekzio espezifikoko zunda fluoreszenteak, dNTPak, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Ur destilatua, etab. |
| Entzima Nahasketa | 16,5 μL/fiola | 1 | / | Taq entzimak, alderantzizko transkriptasa, UNG entzimak, etab. |
| SARS-Cov-2 nahasketa (liofilizatua) | 25 proba/bial | / | 1 | Primer pare espezifikoak, detekzio espezifikoko zunda fluoreszenteak, dNTPak, Taq entzimak, alderantzizko transkriptasa, Ur destilatua, etab. |
| 2x Buffer | 375 μL/fioia | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Ur destilatua, etab. |
Oharra:(1) Lote desberdinetako osagaiak ezin dira nahastu edo trukatu.
(2) Presta ezazu zeure erreaktiboa: Azido nukleikoak erauzteko kit.
【Storage conditions eta expiration date 】
For BST-SARS-25:Garraiatu eta gorde -20±5 ℃-tan denbora luzez.
For BST-SARS-DR-25:Garraioa giro-tenperaturan. Gorde denbora luzez -20±5 ℃-tan.
Saihestu izozte-desizozte ziklo errepikatuak. Baliozko epea behin-behinean 12 hilabeterako ezartzen da.
Ikusi etiketa fabrikazio eta erabilera data ikusteko.
Lehenengo ireki ondoren, erreaktiboa -20 ± 5 ºC-tan gorde daiteke hilabete 1 baino gehiagotan edo erreaktiboen epea amaitu arte, lehenengo data datorrena, izozte-desizozte zikloak errepikatu eta erreaktibo izozte kopurua saihesteko. -desizozte-zikloak ez dira 6 aldiz gainditu behar.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Lagin mota aplikagarria: Erauzitako azido nukleikoko disoluzioa.
2.Laginak biltegiratzea eta garraiatzea: gorde 6 hilabetez-20±5℃-tan. Izoztu eta desizoztu laginak 6 aldiz baino gehiagotan.
【Testing method】
1.Nucleic acid extraction
Hautatu azido nukleikoa erauzteko kit egoki bat azido nukleiko birikoa ateratzeko, eta jarraitu dagozkion kitaren argibideak. Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd.-k ekoitzitako azido nukleikoak erauzteko eta arazteko kit bat edo azido nukleikoen arazketa-kit baliokidea erabiltzea gomendatzen da.
2. Reaction erreagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Kendu SARS-Cov-2 nahasketa eta entzima nahasketa, guztiz urtu giro-tenperaturan nahasketa ondo Vortex gailuarekin eta, ondoren, zentrifugatu labur.
(2) 16,5 uL entzima nahasketa gehitu da 358,5 uL SARS-Cov-2 nahasketara eta ondo nahastu erreakzio mistoaren soluzioa lortzeko.
(3) Prestatu 0,2 ml-ko PCR zortziko hodi garbi bat eta markatu goiko erreakzio-soluzio mistoaren 15 uL putzu bakoitzeko.
(4) Gehitu 15 μL azido nukleiko disoluzio araztua, kontrol positiboa eta kontrol negatiboa, eta arretaz estali zortziko hodiaren tapoia.
(5) Ondo nahastu goitik behera alderantziz, eta azkar zentrifugatu likidoa hodiaren behealdean kontzentratzeko.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) Gehitu 375ul 2x Buffer SARS-Cov-2 Mixari ((Liofilizatua) erreakzio-nahasketa prestatzeko. Ondo nahastu pipetatuz eta, ondoren, zentrifugatu laburki. (Erreakzio-nahasketa prestatu ondoren, -20 ℃-tan gordetzea gomendatzen da. epe luzerako biltegiratzea.)
(2) Prestatu 0,2 ml-ko PCR zortziko hodi garbi bat eta markatu 15μL erreakzio-nahasketarekin putzu bakoitzeko.
(3) Gehitu 15μL azido nukleiko disoluzio araztua, kontrol positiboa eta kontrol negatiboa, eta arretaz estali zortziko hodiaren tapoia.
(4) Ondo nahastu goitik behera alderantziz, eta azkar zentrifugatu likidoa hodiaren behealdean kontzentratzeko.
3. PCR amplification （Mesedez, ikusi tresnaren eskuliburua funtzionamendu-ezarpenetarako.）
3. 1 Jarri PCR 8-hodia PCR fluoreszentearen tresnaren lagin-ganberan, eta ezarri probatu beharreko lagina, kontrol positiboa eta kontrol negatiboa kargaren ordenaren arabera.
3.2 Fluoreszentzia detektatzeko kanala:
(1) ORF1ab geneak FAM-en detekzio-kanala hautatzen du (Reporter: FAM, Quencher: None).
(2) N geneak VIC-en detekzio-kanala hautatzen du (Reporter: VIC, Quencher: None).
(3) Barneko gene estandarrak CY5-en detekzio-kanala hautatzen du (Reporter: CY5, Quencher: None).
(4) Erreferentzia pasiboa ROX-en ezarrita dago.
3.3 PCR programaren parametroen ezarpena:
| Urratsa | Tenperatura (℃) | Denbora | Ziklo kopurua | |
| 1 | Alderantzizko transkripzio erreakzioa | 50 | 15 min | 1 |
| 2 | Taq entzimaren aktibazioa | 95 | 2,5 min | 1 |
| 3 | Taq entzimaren aktibazioa | 93 | 10 s | 43 |
| Analing luzapena eta fluoreszentzia eskuratzea | 55 | 30 s | ||
Ezarri ondoren, gorde fitxategia eta exekutatu erreakzio programa.
4.Results analysis
Programa amaitu ondoren, emaitzak automatikoki gordetzen dira, eta anplifikazio-kurba aztertzen da. Anplifikazio-kurba tresnaren atalase lehenetsian ezartzen da.
【Explanation of test results 】
1. Zehaztu esperimentuaren baliozkotasuna: kontrol positiboa FAM, VIC kanalak anplifikazio-kurba tipikoa izan behar du, eta Ct balioa, oro har, 34 baino txikiagoa da, baina alda daiteke tresna ezberdinen atalasearen ezarpenak direla eta. Kontrol negatiboa FAM, VIC kanala Ct ez-anplifikatua izan behar da. Aurreko baldintzak aldi berean bete behar direla adosten da, bestela proba hau baliogabea izango da.
2. Emaitza judizioa
| FAM/VIC kanala | Epaiaren emaitza |
| Ct<37 | Laginaren proba positiboa da |
| 37≤Ct<40 | Anplifikazio-kurba S formakoa da, eta lagin susmagarriak berriro aztertu behar dira; berriro azterketaren emaitzak koherenteak badira, positibotzat jotzen da, bestela negatiboa da |
| Ct≥40 edo anplifikaziorik gabe | Laginaren proba negatiboa da (edo kitaren detekzioaren beheko mugatik behera) |
Oharra: (1) FAM kanala eta VIC kanala positiboak badira aldi berean, SARS-Cov-2 positiboa dela zehazten da.
(2) FAM kanala edo VIC kanala positiboa bada eta beste kanala negatiboa bada, proba errepikatu behar da. Aldi berean positiboa bada, SARS-Cov-2 positibotzat hartuko da, bestela SARS-Cov-2 negatibotzat hartuko da.
Lotutako produktuak
-
COVID-19 IgM/IgG antigorputzak detektatzeko kit
COVID-19 IgM/IgG antigorputzak detektatzeko kit (Urre koloidalaren immunokromatografia metodoa) Produktu-eskuliburua 【PRODUKTUAREN IZENA】COVID-19 IgM/IgG antigorputzak detektatzeko kit (urre koloidalaren immunokromatografia metodoa) 【PACKAGING Testak, 10/ZEHAZTAPENAK【10/10. LABURPENA】 Koronabirus berriak β generokoak dira. COVID-19 arnas gaixotasun infekzioso akutua da. Pertsonak, oro har, jasangarriak dira. Gaur egun, koronavirus eleberriak kutsatutako pazienteak dira iturri nagusia...
-
Azido nukleikoen erauzketa edo arazteko kit
Azido nukleikoen erauzketa edo arazteko kit edo -20 ℃-tan gordetzen da. Lagina 0 ℃ kizkurra erabiliz garraiatu behar da. Sarrera Azido Nukleikoen Erauzketa edo Purifikazio Kita (Ale Magnetikoaren Metodoa) gorputz-fluidoetatik RNA eta DNA automatikoki arazteko diseinatuta dago (adibidez, swabs, plasma, serum) azido nukleikoen erauzketa automatikoko tresnak erabiliz. Partikula magnetikoen teknologiak kalitate handiko DNA/RNA eskaintzen du, egokia...
-
SARS-CoV-2 Antigenoaren Saiakuntza Kit (Immunokromatogr...
SARS-CoV-2 Antigenoaren Saiakuntza Kit (Immunokromatografia Metodoa) Produktu Gidaliburua 【PRODUKTUAREN IZENA】SARS-CoV-2 Antigenoaren Saiakuntza Kit (Immunokromatografia Metodoa) 【ENBALATEGIAREN ZEHATZAK】 1 Proba/Kit 【LABURPENA】 koronavirusak generoa da. COVID-19 arnas gaixotasun infekzioso akutua da. Pertsonak, oro har, jasangarriak dira. Gaur egun, koronavirus eleberriak kutsatutako pazienteak dira nagusiak...
-
SARS-CoV-2 Antigenoaren Saiakuntza Kit
SARS-CoV-2 Antigenoaren Saiakuntza Kit (Immunokromatografia Metodoa) Produktuen Eskuliburua 【PRODUKTUAREN IZENA】SARS-CoV-2 Antigenoaren Saiakuntza Kit (Immunokromatografia Metodoa) 【PAKETAREN ZEHATZAK】 1 Test/Kit, 25Tests/Kit【STRKit00】, 1000 】 koronavirus berriak β generokoak dira. COVID-19 arnas gaixotasun infekzioso akutua da. Pertsonak, oro har, jasangarriak dira. Gaur egun, koronavirus eleberriak kutsatutako pazienteak dira infekzio iturri nagusia; kutsatutako pertsonak sintomarik gabe...